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大豆异黄酮组分检测

大豆是最为传统的食品之一,其营养成分和生理学作用一直是研究热点,其中大豆异黄酮更是研究焦点。

大豆异黄酮是大豆苯丙氨酸代谢形成的次级代谢产物,主要分布在大豆种子的子叶和胚轴中,在种皮中含量极少。

大豆异黄酮是多酚类的混合物,现已发现3种大豆异黄酮苷元及其9种葡萄糖苷元,如染料木素,大豆苷元和黄豆黄素。糖苷约占总量的95%,主要以丙二酰染料木苷、丙二酰大豆苷、染料木苷等形式存在,有类雌激素的作用。

大豆异黄酮在人的营养健康、畜牧业均有应用广泛的前景。

维百瑞生物构建了基于液相平台同时检测6种大豆异黄酮的方法,可同时检测大豆苷,黄豆黄素苷,大豆苷元,染料木苷,黄豆黄素,染料木素。

大豆异黄酮结构

安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于化学、生物学、中医学与中药学、食品科学技术领域的分析仪器

技术指标

1、流速最大 5 mL/min时压力最高 60 MPa (600 bar, 8700 psi);

2、流速最大5 mL/min时压力最高40 MPa;

3、0.05 – 5.0 mL/min(可设定流速增量为 0.001 mL/min);

4、≤ 0.07 % RSD 或 0.02 min SD,取较大值者;

5、整个波长范围内,一般6.5 nm。



安捷伦1260高效液相色谱

质控说明

▶   进样前会先跑标准品,每个点进两针,保证重复性没有问题后才会跑样品。

▶   上样时每十个样进一个质控样(标样),一般进中间浓度的质控样,与原来的峰面积进行比较,如果峰面积偏差不超过10%则判断稳定性合格。

▶   客户有要求的话可对其样品做添加回收,但一般样品都是盲样,无法很好的控制添加回收的标样量(一般要求添加标样的量和样品中的目标物含量一致)。建议用内标法做会更准确。

▶   对于内源植物激素很难做基质空白对照,如做植物生长调节剂等外源激素,客户可提供空白基质,实验时可扣除基质干扰,使结果更准确。


植物激素质控,南京瑞源生物          植物激素质控,南京瑞源生物          植物激素质控,南京瑞源生物


取样方法

1、样品类型

▶   细胞,取样后离心,去除培养基,立即放入液氮中,之后-80°保存。

▶   叶片、茎、花等,取下后立即放入液氮中,之后-80°保存。

▶   果实的果肉、果皮等,如果野外现场不具备分离条件,需尽快(30MIN内)转移至室内,分离样品放入液氢中,之后-80°保存。

2、混合取样

▶   每份样品混合来自至少3株以上的组织。以水稻叶片为例:取同一时期,表型基本一致的,同一个部位的1片叶片,同时取6株,放到的10M离心管中,并迅速放入液氮中。

3、样品重量和重复

▶   新鲜的、干净的植物样品(鲜样),样本建议量>1G,最少量>0.6G。准备3份及以上生物学重复。

4、储存和运输

▶   采摘样品后立即用液氨速冻统一使用5ML或15ML质量较好的离心管(根据样本类型、大小选择离心管规格)装入样品,需足量的干冰运输至公司。所有盛装样品的管子需在常温下用记号笔清晰标注样品名称(勿在冷冻温度下标注)。另外,由于植物对损伤的应激反应会影响植物激素含量,为得到准确并符合预期的结果,尽量减少植物样品在常温下的暴露时间。


发酵大豆中大豆异黄酮含量检测


          


优势:液相灵敏度可达0.2ug


大豆异黄酮组分检测
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