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植物酶活检测

维百瑞检测平台可依客户需求,以elisa方法检测各类酶含量,或以生化方法检测酶活性。目前已建立的高效且稳定的酶活检测体系。检测酶活覆盖糖酵解、乙醛酸循环、氧化与抗氧化、辅酶等。

产品简介

维百瑞检测平台可依客户需求,以elisa方法检测各类酶含量,或以生化方法检测酶活性。目前已建立的高效且稳定的酶活检测体系。检测酶活覆盖糖酵解、乙醛酸循环、氧化与抗氧化、辅酶等。



序号

检测指标

方法

1

超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒

试剂盒

2

过氧化氢酶(CAT)试剂盒试剂盒
3过氧化物酶(POD)试剂盒试剂盒

4

丙二醛(MDA)试剂盒试剂盒

5

多酚氧化酶(PPO)试剂盒试剂盒

6

苯丙氨酸解氨酶(PAL)试剂盒试剂盒

7

过氧化氢(H2O2)试剂盒试剂盒

8

超氧阴离子(O₂-)含量试剂盒试剂盒

9

抗坏血酸过氧化物酶(APX)试剂盒试剂盒

10

抗坏血酸氧化酶(AAO)试剂盒试剂盒

11

还原型谷胱甘肽(GSH)含量试剂盒试剂盒

12

氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量试剂盒试剂盒

13

谷胱甘肽S-转移酶(GST)试剂盒试剂盒

14

谷胱甘肽还原酶(GR)试剂盒试剂盒

15

硝酸还原酶(NR)试剂盒试剂盒

16

谷氨酰胺酶(GLS)试剂盒试剂盒

17

亚硝酸还原酶(NiR)试剂盒试剂盒

18

还原型抗坏血酸(AsA)/维生素C含量试剂盒试剂盒

19

氧化型/脱氢抗坏血酸(DHA)含量试剂盒试剂盒

20

总抗坏血酸(TAA)含量测定试剂盒

21

α-淀粉酶试剂盒试剂盒

22

β-淀粉酶试剂盒试剂盒

23

总淀粉酶试剂盒试剂盒

24

谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)试剂盒试剂盒

25

谷草转氨酶/天冬氨酸氨基转氨酶(GOT/AST)试剂盒试剂盒

26

羟自由基清除能力试剂盒试剂盒

27

ABTS清除能力试剂盒试剂盒

28

DPPH清除能力试剂盒试剂盒

29

超氧阴离子自由基清除能力试剂盒试剂盒

30

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px/GPX)试剂盒试剂盒

31

总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒试剂盒

32

碱性蛋白酶试剂盒试剂盒

33

酸性蛋白酶试剂盒试剂盒

34

中性蛋白酶试剂盒试剂盒

35

亮氨酸氨基肽酶(LAP)试剂盒

36

单宁酶(Tannase)试剂盒试剂盒

37

脱氢酶(PDHA)试剂盒试剂盒

38

非蛋白质巯基(NPTs)试剂盒试剂盒

39

蛋白质羰基(PCO)试剂盒试剂盒

40

总巯基(TTs)测定试剂盒试剂盒

41

一氧化氮(NO)(硝酸还原酶法)含量检测试剂盒试剂盒

42

硫化氢(H2S)含量检测试剂盒试剂盒

43

单胺氧化酶(MAO)试剂盒试剂盒

44

二胺氧化酶(DAO)试剂盒试剂盒

45

吲哚乙酸氧化酶(IAAO)试剂盒试剂盒

46

酪氨酸解氨酶(TAL)试剂盒试剂盒

47

黄嘌呤氧化酶(XOD)试剂盒试剂盒

48

乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒试剂盒

49

酚氧化酶(PO)活性测定试剂盒/酪氨酸酶活性检测试剂盒试剂盒

50

酚氧化酶(PO)活性测定试剂盒/酪氨酸酶活性检测试剂盒试剂盒

51

硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)试剂盒试剂盒

52

硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)试剂盒试剂盒

53

脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)试剂盒试剂盒

54

单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)试剂盒试剂盒

55

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)/γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)活性试剂盒试剂盒

56

谷氨酰胺合成酶(GS)试剂盒试剂盒

57

脲酶(UE)试剂盒试剂盒

58

γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性试剂盒试剂盒

59

蔗糖合成酶SS-Ⅱ(合成方向)试剂盒试剂盒

60

蔗糖合成酶SS-I(分解方向)试剂盒试剂盒

61

蔗糖磷酸化酶(SPase)试剂盒试剂盒

62

蔗糖磷酸合成酶(SPS)试剂盒试剂盒

63

中性转化酶(NI)/细胞质转化酶试剂盒试剂盒

64

可溶性酸性转化酶(S-AI)/液泡转化酶试剂盒试剂盒

65

细胞壁不溶性酸性转化酶(B-AI)试剂盒试剂盒

66

UDPG焦磷酸化酶/尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶试剂盒试剂盒

67

ADPG焦磷酸化酶/腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶试剂盒试剂盒

68

可溶性淀粉合成酶(SSS)试剂盒试剂盒

69

结合态淀粉合成酶(GBSS)试剂盒试剂盒

70

淀粉分支酶(SBE)试剂盒试剂盒

71

α-葡萄糖苷酶(α - GC)试剂盒试剂盒

72

β-葡萄糖苷酶(β-GC)/纤维二糖酶试剂盒试剂盒

73

α-半乳糖苷酶(α-GAL)试剂盒试剂盒

74

β-半乳糖苷酶(β-GAL)试剂盒试剂盒

75

葡萄糖脱氢酶(GCDH)检测试剂盒试剂盒

76

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒试剂盒

77

内切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维素酶试剂盒试剂盒

78

外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)/纤维二糖苷酶试剂盒试剂盒

79

滤纸酶(FPA)试剂盒试剂盒

80

漆酶(Lac)活性试剂盒试剂盒

81

β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)试剂盒试剂盒

82

葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)试剂盒试剂盒

83

海藻糖酶(Trehalase)试剂盒试剂盒

84

糖原合成酶(GCS)试剂盒试剂盒

85

糖原磷酸化酶a(GPa)试剂盒试剂盒

86

糖原磷酸化酶b(GPb)试剂盒试剂盒

87

糖化酶试剂盒试剂盒

88

二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)试剂盒试剂盒

89

植物果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)试剂盒试剂盒

90

植物果糖-1,6-二磷酸(酯)酶(FBP)试剂盒试剂盒

91

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)试剂盒试剂盒

92

焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(PFP)试剂盒试剂盒

93

3-磷酸甘油醛脱氢酶(NADPH-GAPDH)试剂盒试剂盒

94

乙醇酸氧化酶(GO)试剂盒试剂盒

95

叶绿体3-磷酸甘油酸激酶(PGK)活性测定试剂盒试剂盒

96

多聚半乳糖醛酸酶(PG)/果胶酶试剂盒试剂盒

97

果胶裂解酶(PL)试剂盒试剂盒

98

β-木糖苷酶试剂盒试剂盒

99

α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)试剂盒试剂盒

100

肉桂酸4-羟基化酶(C4H)试剂盒试剂盒

101

肉桂醇脱氢酶(CAD)试剂盒试剂盒

102

淀粉去分支酶(DBE)试剂盒试剂盒

103

细胞壁结合酸性转化酶活性检测试剂盒试剂盒

104

葡萄糖氧化酶(GOD)试剂盒试剂盒

105

抗脂质过氧化能力/LPO抑制率测定试剂盒试剂盒

106

多胺氧化酶(PAO)试剂盒试剂盒

107

NADPH氧化酶(NAO)试剂盒试剂盒

108

甲基乙二醛(MG)含量测试定试剂盒试剂盒

109

乙二醛酶I(Gly I)活性测定试剂盒试剂盒

110

乙二醛酶Ⅱ(Gly II)活性测定试剂盒试剂盒

111

高铁还原酶(FCR)活性测定试剂盒试剂盒

112

β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)/β-葡萄糖醛酸酶(β-G)试剂盒试剂盒

113

β-1,3-1,4-葡聚糖酶活测定试剂盒试剂盒

114

普鲁兰酶活性测定试剂盒试剂盒

115

海藻糖合成酶(TS)活性检测试剂盒试剂盒

116

海藻糖-6-磷酸合酶(TPS)试剂盒试剂盒

117

海藻糖-6-磷酸酯酶(TPP)试剂盒试剂盒

118

山梨醇氧化酶(SOX)测定试剂盒试剂盒

119

6-磷酸葡萄糖胺合成酶(GlmS)/6-磷酸果糖谷氨酰胺氨基转移酶(GFAT)试剂盒试剂盒

120

6-磷酸山梨醇脱氢酶(S6PDH)/醛糖6-磷酸还原酶(A6PR)试剂盒

121

果聚糖水解酶活性测定试剂盒试剂盒

122

丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)活性测定试剂盒试剂盒

123

丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)活性测定试剂盒试剂盒

124

腺苷脱氨酶(ADA)活性测定试剂盒试剂盒

125

天冬酰胺酶(ASNase/asparaginase)活性测定试剂盒试剂盒

126

天冬酰胺合成酶(ASNS)试剂盒试剂盒

127

芳基酰胺酶活性测定试剂盒试剂盒

128

淀粉磷酸化酶试剂盒试剂盒

129

维生素B1(VB1)含量检测试剂盒试剂盒

130

维生素B6检测试剂盒试剂盒

131

维生素E检测试剂盒试剂盒

132

NADH-谷氨酸合成酶(NADH-GOGAT)试剂盒-非绿色组织试剂盒

133

Fd-谷氨酸合成酶(Fd-GOGAT)试剂盒-绿色组织试剂盒

134

NADH-谷氨酸脱氢酶(NADH-GDH)试剂盒-植物动物均可试剂盒

135

NADPH-谷氨酸脱氢酶(NADPH-GDH)试剂盒-酵母菌试剂盒

136

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒试剂盒

137

谷氨酸脱氢酶(GDH)活性检测试剂盒试剂盒

138

内切几丁质酶试剂盒试剂盒

139

外切几丁质酶试剂盒试剂盒

140

几丁质酶活性检测试剂盒试剂盒

141

NAD+-山梨醇脱氢酶(NAD+-SDH)试剂盒试剂盒

142

NADP+-山梨醇脱氢酶(NADP+-SDH)试剂盒试剂盒

143

山梨醇脱氢酶活性检测试剂盒试剂盒

144

半纤维素酶/木聚糖酶试剂盒试剂盒

145

酸性木聚糖酶活性检测试剂盒试剂盒

146

中性木聚糖酶活性检测试剂盒试剂盒

147

碱性木聚糖酶活性检测试剂盒试剂盒

148

丙酮酸脱羧酶(PDC)试剂盒试剂盒

149

ATP含量检测试剂盒试剂盒

150

α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)活性检测试剂盒试剂盒

151

β-葡聚糖含量测定试剂盒试剂盒

152

酰基转移酶(AAT)活性检测试剂盒试剂盒

153

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)活性检测试剂盒试剂盒

154

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性检测试剂盒试剂盒

155

NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)活性检测试剂盒试剂盒

156

6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)活性检测试剂盒试剂盒

157

柠檬酸合酶(CS)活性检测试剂盒试剂盒

158

植物蔗糖酶活性检测试剂盒试剂盒

159

谷氨酸脱羧酶(GAD)试剂盒试剂盒

160

乙醇脱氢酶(ADH)活性检测试剂盒试剂盒

161

锰过氧化物酶(Mnp)试剂盒试剂盒

162

木质素过氧化物酶(Lip)试剂盒试剂盒

163

脂肪酶(LPS)活性检测试剂盒试剂盒

164

胰蛋白酶活性检测试剂盒试剂盒

165

L-乳酸(L-LA)含量检测试剂盒试剂盒

166

羟自由基(OH-)含量测定试剂盒试剂盒

167

D-乳酸(D-LA)含量检测试剂盒(WST显色法)试剂盒

168

磷酸果糖激酶(PFK)活性检测试剂盒试剂盒

169

丙酮酸激酶(PK)活性检测试剂盒试剂盒

170

己糖激酶(HK)活性检测试剂盒试剂盒

171

Elisa试剂盒试剂盒

172

活性氧(ROS)试剂盒



1 . 超氧化物歧化酶SOD测定

    1.1实验方法简介

        采用试剂盒测定超氧化物歧化酶SOD

 

    1.1.1测定原理

        通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜,后者在560nm处有吸收;SOD可清除O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。


    1.1.2试剂

        1)提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;

        2)试剂一:液体15mL×1瓶,4℃保存;

        3)试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存,用时加入27mL蒸馏水,充分摇匀;

        4)试剂三:液体175µL×1支,4℃保存;(与蒸馏水1:1稀释后再用)

        5)试剂四:液体10mL×1瓶,4℃保存。

 

    1.1.3实验步骤

        1)粗酶液提取

            按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆,8000g  4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

        2)测定步骤

            I 分光光度计预热30min以上,调节波长至560nm,蒸馏水调零。

            II 测定前将试剂一、二和四 室温放置。

            Ш 在EP 管中加入下列试剂:

 

试剂名称(μL)

测定管

对照管

试剂一

240

240

试剂二

510

510

试剂三

6

6

样本

90

/

试剂四

180

180

蒸馏水

/

90

充分混匀,室温静置30min后,560nm 处测定各管的吸光值A。

 

注意事项:

试剂三为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

对照管只需要做一管。

 

    1.1.4结果计算

        1)抑制百分率的计算

            抑制百分率=(A对照管-A测定管)÷A对照管×100%

            尽量使样本的抑制百分率控制在30-70%范围内。如果计算出来的抑制百分率小于30%或大于70%,则通常需要调整加样后重新测定。如果测定出来的抑制百分率偏高,则需要将样本用提取液适当稀释;如果测定出来的抑制百分率偏低,则需要重新准备浓度比较高的待测样本。

        2)SOD酶活性单位:在上述黄嘌呤氧化酶耦连反应体系中抑制百分率为50%时,反应体系中的SOD酶活力定义为一个酶活力单位(U/mL)。

        3)组织SOD活性按样本鲜重计算:

            SOD活性(U/g 鲜重)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总]÷(W×V样÷V样总)×样本稀释倍数

        式中:

            V反总:反应体系总体积,mL;

            V样:加入反应体系中样本体积,mL;

            V样总:加入提取液体积,mL;

            W:样品质量,g。

 

2 . 过氧化物酶POD测定

    2.1实验方法简介

        采用试剂盒测定过氧化物酶POD

 

    2.1.1实验原理

        POD广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。POD 催化 H2O2 氧化特定底物,在 470nm有特征光吸收。

 

    2.1.2试剂

        1)提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

        2)试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

        3)试剂二:液体0.33mL×2瓶,4℃保存;用时每瓶加入5mL试剂一;用不完的试剂4℃保存一周;

        4)试剂三:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存。

 

    2.1.3实验步骤

        1)粗酶液提取

            按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

        2)测定步骤和加样表

 

试剂名称(µL

测定孔

样本

15

蒸馏水

270

试剂一

520

试剂二

130

试剂三

135

测定前将试剂一、二和三25℃放置10min。在1mL玻璃比色皿中按顺序加入上述试剂,

立即混匀并计时,记录470nm下30s时的吸光值A1和1min 30s后的吸光值A2。计算ΔA=A2-A1。


    2.1.4结果计算

        按样本鲜重计算:

        单位定义:每g组织在每mL反应体系中每分钟使A470变化0.005定义为一个酶活力单位。

        POD(U/g鲜重)=△A×V反总÷(W×V样÷V样总)÷0.005÷T×A

    式中:

        V反总:反应体系总体积,mL;

        V样:加入样本体积,mL;

        V样总:加入提取液体积,mL;

        T:反应时间,min;

        A:稀释倍数;

        W:样品质量,g。

 

3.1 丙二醛含量测定

    3.1.1实验原理

        MDA与硫代巴比妥酸缩合,生成红色产物,在532nm有最大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。

 

    3.1.2试剂

        1)提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;

        2)试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。

 

    3.1.3实验步骤

        1)粗酶液提取

            按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

        2)测定步骤

            吸取0.6mL试剂一于1.5mL离心管中,再加入0.2mL样本,混匀。

            95℃水浴保温30min,取出置冰水浴冷却,然后10000g,离心10min,

            吸取上清液于1mL比色皿中,测定532nm和600nm处的吸光度,蒸馏水调零,测各管吸光度值。△Abs=A532-A600

 

    3.1.4结果计算

        组织中MDA含量(nmol/g鲜重)=[△A×V反总÷(ε×d)×109]÷(W×V样÷V样总)

    式中:

        V反总:反应体系总体积,L;

        ε:丙二醛摩尔消光系数,155×103 L/mol/cm;

        d:比色皿光径,1cm;

        V样:加入样本体积,mL;

        V样总:加入提取液体积,mL;

        W:样本质量,g

 

4.1过氧化氢酶(CAT)测定

    4.1.1测定原理

        过氧化氢酶(CAT)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最重要的H2O2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。

        H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能够分解H2O2,使反应溶液240nm下的吸光度随反应时间下降,根据吸光度的变化率可计算出CAT活性。

 

    4.1.2试剂

        1)提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

        2)试剂一:液体60mL×1 瓶,4℃保存;

        3)试剂二:液体100μL×3瓶,4℃保存,

 

    4.1.3实验步骤

        1)粗酶液提取

            按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

        2)测定步骤

            1、分光光度计预热30min以上,调节波长至240nm处,蒸馏水调零。

            2、CAT检测工作液的配置:用时在每瓶试剂二(100μL)中加入20mL试剂一,充分混匀,作为工作液;用不完的试剂4℃保存一周。

            3、测定前将CAT检测工作液25℃水浴10min。

            4、取1mLCAT检测工作液于1mL石英比色皿中,再加入35μL样本,混匀5s;室温下立即测定240nm下的初始吸光值A1和1min后的吸光值A2。计算△Abs=A1-A2

 

    4.1.4结果计算

        单位定义:每g组织在反应体系中每分钟催化1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。

        组织中CAT含量(U/g鲜重)=[△A×V反总÷(ε×d)×109]÷(W×V样÷V样总)÷T

    式中:

        V反总:反应体系总体积,L;

        ε:H2O2摩尔消光系数,4.36×104 L/mol/cm;

        d:比色皿光径,1cm;

        V样:加入样本体积,mL;

        V样总:加入提取液体积,mL;

        W:样本质量,g

        T:反应时间,1min

 


SOD酶活力

POD酶活力

MDA酶活力

CAT酶活力

样品名称

(U/g鲜重)

(U/g鲜重)

(nmol/g)

(U/g)

154

189.505

191076.815

16.913

150.562

157

150.008

149800.000

9.108

146.288

160

242.990

102834.016

12.163

145.934

161

185.456

134936.285

10.473

187.663

162

274.655

137605.484

10.614

188.304

163

122.440

88950.067

11.144

146.449

165

184.585

145627.220

8.684

174.982

166

321.184

196175.253

8.946

228.585

 

 

 

 

 



取样方法

1、样品类型

▶   细胞,取样后离心,去除培养基,立即放入液氮中,之后-80°保存。

▶   叶片、茎、花等,取下后立即放入液氮中,之后-80°保存。

▶   果实的果肉、果皮等,如果野外现场不具备分离条件,需尽快(30MIN内)转移至室内,分离样品放入液氢中,之后-80°保存。

2、混合取样

▶   每份样品混合来自至少3株以上的组织。以水稻叶片为例:取同一时期,表型基本一致的,同一个部位的1片叶片,同时取6株,放到的10M离心管中,并迅速放入液氮中。

3、样品重量和重复

▶   新鲜的、干净的植物样品(鲜样),样本建议量>1G,最少量>0.6G。准备3份及以上生物学重复。

4、储存和运输

▶   采摘样品后立即用液氨速冻统一使用5ML或15ML质量较好的离心管(根据样本类型、大小选择离心管规格)装入样品,需足量的干冰运输至公司。所有盛装样品的管子需在常温下用记号笔清晰标注样品名称(勿在冷冻温度下标注)。另外,由于植物对损伤的应激反应会影响植物激素含量,为得到准确并符合预期的结果,尽量减少植物样品在常温下的暴露时间。

 

样本建议3个生物学重复

植物酶活检测
维百瑞检测平台可依客户需求,以elisa方法检测各类酶含量,或以生化方法检测酶活性。目前已建立的高效且稳定的酶活检测体系。检测酶活覆盖糖酵解、乙醛酸循环、氧化与抗氧化、辅酶等。
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